我係從水污染的文章中找到的。希望對大家有用。
大型蚤(指德國米粒水蚤 Daphnia magna)的培養繁殖方法
Daphnia magna
A1 試驗蚤的選育
試驗蚤(Daphnia magna)可以從其他試驗室已有的純培養中挑取、引種，也可以從野外採集。野外採集的蚤要經分離、純化，在顯微鏡下鑒定後，選擇體大、健康的母體數個，用50mL小燒杯單個培養。選擇繁殖量最大的一代為母蚤，單克隆化，使之成為純品系。
A2 餌料
雌性的大型蚤可以在20℃生存4個月之久。蚤類喜食藻類、細菌、酵母及有機物碎屑等。藻類的營養價值高於其他食物，本方法推薦用實驗室培養的柵藻為大型蚤的餌料。柵藻的培養方法見附錄B。
A3 容器
單個培養母蚤可用50mL小燒杯，繁殖培養用2000mL大燒杯，儲備培養用30cm×30cm圓玻璃缸，或類似大小的水簇箱。
A4 餵養
用不含無機培養劑的柵藻擴大培養液餵養大型蚤。可以採用每週3次全部更換水蚤培養液的辦法，也可以每天追加一次濃縮懸浮藻液。培養液中柵藻的濃度不宜過高，一般在106個／L左右，藻液的顏色以淡蘋果綠色為宜。否則晚間缺氧會引起大型蚤的死亡。
A5 培養條件
氯氣對大型蚤生存不利，培養用水可選用經自然曝氣三天以上的自來水或人工配製的稀釋水，大型蚤生存的適宜溫度為17±25℃，適宜的pH為6.5～8.5。大型蚤的密度以每升水中培養50個左右母蚤為宜。過分擁擠，會造成大型蚤停止孤雌生殖。大型蚤對氧有較強的適應能力，培養液中可保持2mg／L以上的溶解氧。
A6 實驗蚤的分離
大型蚤的生長是間歇性的、生長與脫殼交替進行。每脫殼一次，增加一齡，前後脫殼的時間叫齡期。性成熟前的齡期為幼齡蚤，性成熟後的為成齡蚤。大型蚤有4～6個幼齡期，幼齡蚤比成齡蚤對毒物更敏感。運動受抑制試驗一般選用實驗室條件下培養3代以上的、出生6～24h的幼蚤，最好為同一母體後代。採用下述方法可以獲得出生後6～24h的幼蚤。試驗前從實驗室儲備缸中挑取20～30個懷卵母蚤，放在一個2000mL燒杯中單獨培養。18h後取走母蚤，幼蚤仍在原繁殖缸中培養，24h時，此繁殖缸中的幼蚤即為出生6～24h的幼蚤。為保證大型蚤的良好繁殖，採用下述方法分離母蚤。用孔徑1000μm尼龍網縫製成一個杯形的網袋(略小於繁殖缸)套在繁殖缸內壁，將母蚤放入網內，定期提出裝有母蚤的尼龍網。放入另一個盛有斜生柵藻培養液的培養缸中。也可採用使繁殖缸的液體通過上、下套合在一起的兩個篩網的方法獲取試驗蚤。上層篩網的孔徑為800～1000μm，下層篩網的孔徑為450～500μm。母蚤被阻止在上層粗網上，幼蚤被阻止在下層細網上。用新鮮斜生柵藻擴大培養液，將濾得的水蚤分別沖入繁殖缸內。試驗期間每天分離一次，注明幼蚤的出生日期，便得到出生不同時間的幼蚤。定期淘汰老母蚤。
附錄B 斜生柵藻的培養技術
(補充件)
斜生柵藻具有較豐富的營養價值。實驗室實踐證明，用斜生柵藻餵養大型蚤，蚤的生長快，個體大，繁殖量高
。保持實驗室內斜生柵藻的良好生長是養好大型蚤的關鍵。
B1 培養基
實驗室要經常保持一定數量的斜生柵藻藻種，可採用各種適用的培養劑，本方法推薦用水生4號培養劑。 培養
基成分(配1000mL)如下：
硫酸銨(NH4)2SO4 0.200g
過磷酸鈣[Ca(H2PO4)2‧H2O‧(CaSO4‧H2O)]飽和液1mL
硫酸鎂(MgSO4‧H2O) 0.080g
碳酸氫鈉(NaHCO3) 0.100g
氯化鉀(KCL) 0.025g
氯化鐵(FeCl3)1％(m／m)0.15mL
土壤浸出液 0.500mL
D2 藻種的培養
斜生柵藻可在搖床上振動培養，也可在流動通氣條件下連續培養，最簡單的培養方法是用1000mL三角瓶，裝300～400mL培養液，或者用3000mL三角瓶裝1000mL培養液，接種藻種使成淡綠色。瓶口加鬆軟棉團以防污染，溫度在15～25℃，光照在3000～40001x連續靜止培養。可採用40W日光燈人工光照，燈源距離約2m，也可用自然光照，避免陽光直射，日光照6～10h。每天搖動5～6次，經幾天培養後藻液變為深綠色。培養好的藻液可做為擴大牆養用，也可經離心濃縮，或自然沉澱濃縮製成濃縮掖，貯於冰箱備用。藻種培養當中要經常鏡檢，檢查是否有雜藻、纖毛蟲和輪蟲。藻種要經常轉接，以防止老化。轉接的時間視藻種生長的情況而定，一般每週1～2次，藻液發深綠色即要轉接。老化藻在顯微鏡下可明顯見到聚集成團的藻群、色素變黃，搖動振盪後，仍出現大量沉澱。
D3 斜生柵藻的擴大培養
為獲得培養大型蚤的足夠餌料，可在實驗室內進行斜生柵藻的擴大培養。擴大培養採用30cm×30cm的圓玻璃缸，或類似大小的水蔟箱。在玻璃缸中加入培養好的柵藻液(B2)，用經自然曝氣的自來 水稀釋成淡綠色。擴大培養中不加任何營養鹽。可放置10～20條斑馬魚(其他不食斜生柵簸的色也可)，每天照舊投魚餌。魚可以起攪拌作用。其排泄物也有利於柵藻的生長。擴大培養的柵藻液可直接喂大型蚤。
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